Orina de la mitad de la cadena.
La orina como biopsia líquida ha demostrado ser muy prometedora, ya que es rápida y no depende del médico. Además, la orina puede recogerse en grandes cantidades. Sin embargo, a pesar de que la orina contiene biomarcadores útiles y relevantes para el diagnóstico, la recogida de orina plantea retos.
La estabilidad necesaria de una muestra de orina depende en gran medida del análisis que se vaya a realizar. La adición de conservantes permite una conservación sustancialmente más larga del contenido de la orina para fines de diagnóstico.
La orina no conservada puede dar lugar a cambios metabólicos que influyen en la calidad de la muestra. Además, para evitar la dilución de la muestra, o una preservación insuficiente, se debe asegurar la proporción entre el conservante y la orina (4). Nuestros datos demuestran que para la UCM la relación conservante/muestra es de 1:3 para un rendimiento óptimo de la conservación.
Una de las principales ventajas de la orina como biopsia líquida en comparación con la toma de muestras de sangre es que no es en absoluto invasiva y no requiere de un clínico para la recogida de muestras. Además, en términos de análisis, el aislamiento del ADN de la orina es, en teoría, más fácil que el de la sangre, debido al bajo contenido de proteínas tras la filtración en el riñón (5).
Análisis de orina
Los conservantes que pueden evitar la destrucción de células, cilindros y bacterias en la orina son de gran importancia práctica porque permiten centralizar y mejorar la precisión del recuento de partículas en la orina. Se compararon dos mezclas propias y una solución comercial, así como la refrigeración, en cuanto a su capacidad para conservar la orina tanto para el análisis automatizado (citometría de flujo) como para la microscopía visual.
Las muestras de orina se conservaron mediante refrigeración a 4 grados C sin conservantes (procedimiento 1); en una solución liofilizada destinada a conservar las muestras para el cultivo bacteriano (tubos C&S de orina; BD Preanalytical Solutions; procedimiento 2); en 10 mL/L de formalina-0,15 mol/L de NaCl (procedimiento 3); en 80 mL/L de etanol-20 g/L de polietilenglicol (procedimiento 4); y mediante el almacenamiento a 20 grados C sin conservantes (procedimiento 5). Las mediciones de las tiras reactivas se utilizaron para seleccionar los especímenes positivos para la esterasa leucocitaria, la hemoglobina, la albúmina o el nitrito. Para 106 especímenes consecutivos positivos a las tiras, se realizó un análisis de orina por UF-100 (Sysmex) y por microscopía de contraste de fase tras la tinción supravital de Sternheimer. Los análisis automatizados se realizaron a la llegada por la mañana, el mismo día por la tarde y después de 1 y 3 días. La microscopía visual se realizó a la llegada y 3 días después.
Orina de captura limpia
La orina representa un medio atractivo y no invasivo para obtener biopsias líquidas para el diagnóstico oncológico. Especialmente el análisis molecular del ADN urinario es un campo de rápido crecimiento. Sin embargo, aún no se han determinado las condiciones óptimas y prácticas de almacenamiento que permiten conservar el ADN urinario y, en particular, el ADN hipermetilado (ADNh).
En el estudio piloto, el ADN para el análisis de metilación sólo se mantuvo a RT tras la adición de agentes conservantes. En la orina almacenada a 4°C durante un período de 7 días o más, la adición de cualquiera de los agentes conservantes produjo una conservación ligeramente mejor del ADN. Cuando la orina se almacenó a -20 °C o -80 °C durante un período de hasta 28 días, el ADN se conservó independientemente de la adición de agentes conservantes. En las muestras de cáncer de vejiga y de CPNM almacenadas a RT, la pérdida de ADN fue significativamente menor si se añadía EDTA en comparación con la ausencia de agentes conservantes (p<0,001). La adición de PenStrep no afectó a la conservación del ADN (p>0,99). Tras el almacenamiento a 4°C, no se encontraron diferencias en la conservación del ADN tras la adición de agentes conservantes (p = 0,18). La preservación del ADN metilado (RASSF1A) estaba fuertemente correlacionada con la del ADN no metilado (ACTB) en la mayoría de los casos, excepto cuando los valores de la PCR se volvieron inexactos.
Orina a mitad de camino
Si se solicita, el laboratorio puede añadir conservantes a la jarra de recogida antes de que se haya recogido la muestra. Todas las jarras de recogida con conservantes deben estar etiquetadas con la siguiente información
1) Tipo y cantidad de conservante añadido.2) Fecha de adición del conservante.3) Iniciales del preparador.4) Completar toda la información del paciente en la etiqueta que contiene las instrucciones de recogida y adjuntarla al recipiente.
NOTA: 6N HCL – PRECAUCIÓN: ácido 6N HCL añadido, irritante para la piel y los ojos. Consulte la hoja de datos de seguridad del material. Ácido acético al 33% – PRECAUCIÓN: Ácido acético al 33% añadido, irritante para la piel y los ojos. Véase la ficha de datos de seguridad.Ácido bórico – PRECAUCIÓN: Ácido bórico añadido, venenoso. Véase la hoja de datos de seguridad del material.
A continuación se enumeran las pruebas de orina de 24 horas y los conservantes necesarios para cada una de ellas. Las preguntas específicas sobre la combinación de las pruebas de orina de 24 horas o los conservantes alternativos deben remitirse al departamento de procesamiento de RML al 744-2500 ext. 15506 o al 1-800-722-8077.
Mantenga el pH por debajo de 7,5. La muestra sin conservante es aceptable si se mantiene refrigerada durante la recogida. Es aceptable añadir conservante después de la recogida si la orina fue refrigerada durante la misma.
